Fecal microbiota transplantation via colonoscopy in a dog with Clostridioides (Clostridium) difficile infection / Transplante de microbiota fecal via colonoscopia em um cão com infecção por Clostridioides (Clostridium) difficile

ABSTRACT: In dogs, antimicrobial therapy for Clostridioides (Clostridium) difficile infection (CDI) is based solely on metronidazole, leaving limited treatment options in case of recurrent disease. Fecal microbiota transplantation (FMT) has been successfully used in humans with recurrent CDI, whereas the usefulness of this approach is largely unknown in dogs. In the present study, a dog with a chronic-recurring diarrhea was treated with FMT via colonoscopy. CDI was confirmed by A/B toxin detection and isolation of toxigenic C. difficile from ribotype 106, a strain also commonly associated with nosocomial infection in humans. The dog recovered well after the procedure and C. difficile was no longer isolated from its stool sample. The present research suggested that FMT could be a useful tool to treat recurrent CDI in dogs, corroborating the actual protocol in humans.

RESUMO: Em cães, a terapia antimicrobiana para infecções por Clostridioides (Clostridium) difficile é baseada apenas no uso de metronidazol, limitando as opções de tratamento nos casos de recorrência. O transplante de microbiota fecal (FMT) tem sido utilizado com sucesso em seres humanos com infecções recorrentes por C. difficile, porém a utilidade desse método é ainda amplamente desconhecida em cães. O presente trabalho relata a utilização de FMT para o tratamento de um cão com diarreia crônica-recorrente por C. difficile. A infecção foi confirmada por detecção das toxinas A/B e isolamento de uma estirpe toxigênica do ribotipo 106, linhagem comumente associada a infecção em seres humanos. Após o transplante via colonoscopia, o animal se recuperou do quadro e C. difficile não mais foi encontrado em novas amostras fecais. O presente trabalho sugere que o FMT possa ser útil para o tratamento de quadros de C. difficile em cães, corroborando protocolo atual de tratamento em seres humanos.

Clostridioides (Clostridium) difficile-associated diarrhea in equine in Minas Gerais, Brazil: clinical and microbiological characterization of six cases / Diarreia por Clostridioides (Clostridium) difficile em equinos em Minas Gerais, Brasil: caracterização clínica e microbiológica de seis casos

ABSTRACT: Clostridioides (Clostridium) difficile is the main causative agent of antimicrobial-related diarrhea in humans and a major pathogen-associated enteric disorder in foals and adult horses. Moreover, studies have suggested that animals are a possible reservoir of toxigenic C. difficile strains for humans. Despite this known importance, the epidemiology of C. difficile infection (CDI) in equine is still largely unknown. Therefore, this study described six cases of equine CDI occurring in Minas Gerais, Brazil, including the characterization of the isolates. All but one equine included in this research developed CDI after antimicrobial therapy, three of which occurred during hospitalization. Coinfection with Salmonella Heidelberg and S. Infantis was detected in three cases, making the antimicrobial treatment challenging. All animals recovered after metronidazole administration. All C. difficile isolates were susceptible to metronidazole and vancomycin, while three were resistant to moxifloxacin and two were resistant to clindamycin. The isolates were classified as RT126 (n = 4), RT078 (n = 1), and RT014/020 (n = 1), all previously reported infecting humans and animals worldwide.

RESUMO: Clostridioides (Clostridium) difficile é o principal agente envolvido em diarreias associadas ao uso de antimicrobianos em seres humanos e um enteropatógeno de grande relevância em quadros de diarreia em potros e equinos adultos. Em adição, estudos tem sugerido que animais são possíveis reservatórios de estirpes toxigênicas de C. difficile para humanos. Apesar da importância na saúde animal e humana, a epidemiologia da infecção por C. difficile (ICD) é ainda pouco conhecida. Dessa forma, o presente estudo tem como objetivo caracterizar seis casos de diarreia por C. difficile ocorridos em Minas Gerais, Brasil. Com exceção de um animal, todos os equinos incluídos no presente estudo desenvolveram ICD após antibioticoterapia, três dos quais durante a hospitalização. Coinfecção por Salmonella Heidelberg e S. Infantis foi detectada em três casos, tornando o tratamento antimicrobiano desafiador. Todos os animais recuperaram após administração de metronidazol. Os isolados obtidos no presente estudo foram sensíveis a metronidazol e vancomicina, porém três estirpes foram resistentes a moxifloxacina e duas a clindamicina. Os isolados foram classificados como ribotipos 126 (n=4), 078 (n=1) e 014/020 (n=1), todos previamente relatados em seres humanos com ICD no Brasil e em outros países.

Outbreak of multidrug resistant Salmonella Typhimurium in calves at a veterinary hospital in Brazil / Surto de Salmonella Typhimurium multirresistante em bezerros em um hospital veterinário do Brasil

ABSTRACT: The present study aimed to describe and characterize a nosocomial outbreak caused by a multidrug resistant Salmonella Typhimurium in hospitalized calves at a veterinary medical teaching hospital from Brazil. Sixty-three (96.9%) calves showed lethargy, hyperthermia and profuse diarrhea and despite treatment, 26 (41.2%) animals died. Five animals were necropsied and stool samples of six calves were collected. The isolated strains were subjected to antimicrobial susceptibility test by disc-difusion method and were fingerprinted by ERIC-PCR. Macroscopic lesions suggestive of salmonellosis, such as fibrinonecrotic enteritis and hepatosplenomegaly were observed. Salmonellosis was confirmed by isolation of S. Typhimurium from stool samples and organs from seven affected animals. Six out of seven isolates of S. Typhimurium, exhibited 100% of similarity at ERIC-PCR, suggesting occurrence of nosocomial transmission of S. Typhimurium among the hospitalized calves. All but one S. Typhimurium isolated were resistant to marbofloxacin, enrofloxacin, florfenicol, oxytetracycline and trimethoprim/sulfamethoxazole, antimicrobial agents largely used for humans and animal treatment. This is the first study of a nosocomial outbreak of multidrug resistant S. Typhimurium in a veterinary hospital in Brazil and highlighted the need for preventive measures to reduce the risks for inpatients and humans in contact with animals.

RESUMO: O objetivo do presente estudo é descrever e caracterizar um surto nosocomial provocado por S. Typhimurium multirresistente em bezerros hospitalizados em um hospital escola de medicina veteriária localizado no Brasil. Sessenta e três (96,9%) bezerros apresentaram letargia, hipertermia e diarreia profusa e, apesar do tratamento, vinte e seis animais (41,2%) morreram. Cinco animais foram necropsiados e amostras fecais de seis bezerros foram coletadas. As estirpes isoladas foram submetidas a testes de susceptibilidade a antimicrobianos pelo método de disco-difusão e foram genotipadas pelo ERIC-PCR. Lesões macroscópicas sugestivas de salmonelose, como enterite fibrinonecrótica e hepatoesplenomegalia, foram observadas. Salmonelose foi confirmada pelo isolamento de S. Typhimurium em amostras fecais e órgãos de sete animais. Dos sete isolados, seis apresentaram 100% de similaridade ao ERIC-PCR, sugerindo ocorrẽncia de transmissão nosocomial de S. Typhimurium entre os bezerros hospitalizados. Com excessão de uma estirpe, todas foram resistentes a marbofloxacina, enrofloxacina, florfenicol, oxitetraciclina e trimetoprima/sulfametoxazol, agentes antimicrobianos amplamente utilizados para o tratamento humano e animal. Esse é o primeiro estudo que demonstra um surto nosocomial de estirpes de S. Typhimurium resistentes a múltiplas drogas em um hospital veterinário no Brasil, enfatizando a necessidade de medidas preventivas que reduzam os riscos aos animais hospitalizados e a pessoas que entrarem em contato com esses animais.

Pesquisa de Clostridium perfringens em carnes bovinas embaladas a vácuo comercializadas no Distrito Federal e entorno / Clostridium perfringens research on vacuum packed beef commercialized on Distrito Federal and in the surrounding area

O objetivo deste trabalho foi detectar a presença de Clostridium perfringens em 54 amostras de carne bovina embaladas a vácuo comercializadas na região do Distrito Federal, bem como detectar a presença da toxina cpe por PCR, ainda avaliar os meios de cultivo ágar SPS® e ágar TSC®, com e sem etapa de pré-enriquecimento das amostras em caldo infusão de cérebro e coração (BHI) na câmara de anaerobiose, e posterior incubação das placas de SPS® e TSC® tanto em jarra de anaerobiose, como em câmara de anaerobiose. Na análise da incubação das placas em ágar SPS® e TSC®, sem a etapa de pré-enriquecimento em caldo BHI na câmara de anaerobiose, observou-se o crescimento em apenas uma (1,85%) das 54 amostras analisadas, em ambos os meios de cultivo e formas de incubação. Com a etapa de pré-enriquecimento com caldo BHI em câmara de anaerobiose, observou-se crescimento em todas as 54 amostras (100%), em ambos os meios de cultivo e formas de incubação. Na reação em cadeia de polimerase (PCR) nenhuma das cepas oriundas das amostras analisadas apresentaram a amplificação de fragmento do gene da toxina cpe. Os resultados evidenciam a presença de C. perfringens em carnes embaladas a vácuo comercializadas no Distrito Federal e Entorno, porém não foi detectada a toxina cpe em nenhuma cepa isolada analisada. Na comparação estatística aplicando o teste qui-quadrado de McNemar, observou-se que houve diferença significativa (p<0,001) entre as análises sem e com a etapa de pré-enriquecimento em caldo BHI, verificando-se a influencia positiva do meio na recuperação de esporos, destacando desta forma a importância do enriquecimento prévio em meio BHI e a incubação em câmara de anaerobiose, na recuperação de esporos deste microrganismo.

The aim of this work was to detect Clostridium perfringens in 54 samples of vacuum packed beef sold at the Federal District area, and to detect the presence of the cpe toxin gene by Polymerase chain reaction (PCR), also evaluate the culture medium SPS® agar and TSC® agar, with and without pre-enrichment step of the samples in Brain Heart Infusion (BHI) broth in the anaerobic chamber, and to promote the incubation of the plates in anaerobic jar and anaerobic chamber. The results of the incubation on SPS® agar and TSC® agar, without the pre-enrichment step in BHI, growth was observed in only one (1,85%) of the 54 analyzed samples, in both culture media and incubation methods. With the pre-enrichment step with BHI broth in the anaerobic chamber, growth was observed in all 54 samples (100%), in both culture media and incubation methods. At the PCR, In the polymerase chain reaction (PCR), none of the strains from the analyzed samples showed fragment amplification of the toxin cpe gene. The results showed the presence of C. perfringens in vacuum packed beef samples commercialized at the Distrito Federal area and surroundings, however the cpe toxin was not detected in any isolated strain analyzed. In the statistical test using the McNemar chi-square test, a significant difference (p<0,001) was observed between the analysis with and without pre-enrichment step in BHI broth, verifying the positive influence of the medium in spore recovery, therefore to enhance the importance of the pre-enrichment stage in BHI broth and the incubation in anaerobic chamber in spore recovery for this microorganism.

Antimicrobial susceptibility and molecular characterization of Salmonella serovar Ndolo isolated from outbreaks in cattle and horses / Susceptibilidade antimicrobiana e caracterização molecula de isolados de Salmonella sorovar Ndolo de bovinos e equinos

ABSTRACT: The present study aimed to describe and characterize, for the first time, two outbreaks of salmonellosis caused by Salmonella Ndolo in foals and calves in Brazil and compare the isolated strains with S. Ndolo previously identified in asymptomatic reptiles. The affected calves and foals presented fever, lethargy, and profuse diarrhea. Isolated strains were subjected to antimicrobial susceptibility testing, characterized according to virulence genes, and fingerprinted by ERIC-PCR. Salmonella Ndolo was identified in fecal samples from two foals and four calves. One isolate from a calf was resistant to amoxicillin/clavulanic acid, trimethoprim/sulfamethoxazole, and florfenicol. Strains from two other calves were resistant to oxytetracycline. All virulence genes tested were present in the isolates, and two major clusters of closely related strains were identified by ERIC-PCR, each per outbreak. This is the first report of Salmonella Ndolo infection in domestic and symptomatic animals. Previously, this serovar had been identified only in human infections. The presence of relevant virulence genes in all Salmonella Ndolo isolates and the detection of antimicrobial multi-resistant strains highlighted the importance of monitoring serovars associated with salmonellosis in domestic animals.

RESUMO: O objetivo do presente estudo foi descrever e caracterizar, pela primeira vez, dois surtos de salmonelose causados por Salmonella Ndolo em potros e bezerros do Brasil e comparar esses isolados com Salmonella Ndolo previamente identificada em répteis assintomáticos. Os animais infectados apresentaram febre, letargia e diarreia profusa. Os isolados foram submetidos a testes de susceptibilidade a antimicrobianos e foram caracterizados conforme a presença de genes de virulência e diversidade genética, utilizando-se o ERIC-PCR. Salmonella Ndolo foi identificado em amostras fecais de dois potros e quatro bezerros. Um isolado de bezerro foi resistente a amoxicilina/ácido clavulanico, trimethoprima/sulfametoxazol e florfenicol. Estirpes de dois outros bezerros foram resistentes a oxitetraciclina. Todos os genes de virulência testados foram identificados nos isolados e dois grandes grupos de estirpes geneticamente relacionadas foram identificados pelo ERIC-PCR, um para cada surto. Esse é o primeiro relato de Salmonella Ndolo em animais domésticos e sintomáticos. Previamente, esse sorovar foi identificado apenas em infecções humanas. A presença de fatores de virulência relevantes em todos os isolados e a detecção de estirpes multirresistentes a antimicrobianos destaca a importância do monitoramento de sorovares associados a salmonelose em animais domésticos.

Detection of virulence genes and the phylogenetic groups of Escherichia coli isolated from dogs in Brazil / Detecção de genes de virulência e grupos filogenéticos de amostras Escherichia coli isoladas de cães no Brasil

ABSTRACT: This study identified the virulence genes, pathovars, and phylogenetic groups of Escherichia coli strains obtained from the feces of dogs with and without diarrhea. Virulence genes and phylogenetic group identification were studied using polymerase chain reaction. Thirty-seven E. coli isolates were positive for at least one virulence factor gene. Twenty-one (57.8%) of the positive isolates were isolated from diarrheal feces and sixteen (43.2%) were from the feces of non-diarrheic dogs. Enteropathogenic E. coli (EPEC) were the most frequently (62.2%) detected pathovar in dog feces and were mainly from phylogroup B1 and E. Necrotoxigenic E. coli were detected in 16.2% of the virulence-positive isolates and these contained the cytotoxic necrotizing factor 1 (cnf1) gene and were classified into phylogroups B2 and D. All E. coli strains were negative for the presence of enterotoxigenic E. coli (ETEC) enterotoxin genes, but four strains were positive for ETEC-related fimbriae 987P and F18. Two isolates were Shiga toxin-producing E. coli strains and contained the toxin genesStx2 or Stx2e, both from phylogroup B1. Our data showed that EPEC was the most frequent pathovar and B1 and E were the most common phylogroups detected in E. coli isolated from the feces of diarrheic and non-diarrheic dogs.

RESUMO: Este estudo pesquisou genes de virulência, patovares e grupos filogenéticos de amostras de E. coli isoladas de fezes de cães com e sem diarreia. Os genes de virulência e a identificação de grupos filogenéticos foram estudados pela técnica de reação em cadeia da polimerase (PCR). 37 isolados de E. coli foram positivos para pelo menos um fator de virulência na análise de PCR. Destes, 21 (57,8%) foram isolados de fezes de cães com diarreia e 16 (43,2%) de fezes de cães não diarreicos. E. coli enteropatogênica (EPEC) (23/37, 62,2%) foi o patovar mais frequente detectado em fezes de cães e foram classificados principalmente como filogrupos B1 e E. E. coli necrotoxigênica (NTEC) positivos para CNF1 foram detectados (6/37, 16,2%) e classificados como B2 e D. Todas as amostras de E. coli foram negativas quanto à presença de genes de enterotoxinas de E. coli enterotoxigênica (ETEC), mas quatro amostras foram positivas para fimbrias relacionadas ao ETEC, 987P (2) e F18 (2). As amostras de E. coli (STEC) produtora de toxina Shiga foram positivas para a toxina Stx2 (1/37) e Stx2e (1/37), ambas do filogrupo B1. Nossos resultados indicaram que EPEC foi o patovar mais frequente e B1 e E foram os filogrupos mais comuns detectados em amostras E. coli isoladas de fezes de cães diarreicos e não diarreicos.

Isolation and genotyping of Clostridium perfringens from goats in Minas Gerais, Brazil / Isolamento e genotipagem de Clostridium perfringens isolados de cabras em Minas Gerais, Brasil

ABSTRACT: Despite the known importance of Clostridium perfringens as an enteropathogen in small ruminants, little is known about the role of its additional virulence factors or the frequency of the various C. perfringens genotypes in healthy goats; this complicates the laboratory diagnosis of the infections caused by this microorganism. In light of this, the aim of the present study was to isolate and genotype C. perfringens from stool samples from healthy goats in Brazil. Stool samples from 250 apparently healthy adult goats from 17 different herds in Minas Gerais, Brazil were collected, and isolation and genotyping of C. perfringens was performed. C. perfringens type A was isolated from 189 (75.6%) goats, whereas C. perfringens types C and D were each detected in one goat (0.4%). All isolates were negative for enterotoxin-, NetB-, NetE-, and NetF-encoding genes. These results confirmed C. perfringens type A as part of the microbiota in these animals, and they suggested that C. perfringens type C and D are rarely isolated from healthy goats.

RESUMO: Apesar da reconhecida importância de Clostridium perfringens como enteropatógeno de pequenos ruminantes, pouco se sabe sobre a frequência dos genótipos ou do papel de fatores de virulência adicionais de C. perfringens em cabras saudáveis, dificultando o diagnóstico laboratorial da infecção causada por esse micro-organismo. Dessa forma, o presente estudo teve como objetivo caracterizar C. perfringens de amostras de fezes de cabras adultas saudáveis. Amostras de fezes de 250 cabras saudáveis de 17 rebanhos diferentes em Minas Gerais, Brasil, foram submetidas ao isolamento e genotipagem de C. perfringens. C. perfringens tipo A foi isolado de 189 (75,6%) cabras, enquanto C. perfringens tipos C e D foram detectados em um animal (0.4%) cada. Todos os isolados foram negativos para os genes codificadores das toxinas NetB, NetE, NetF e enterotoxina. Os resultados apresentados confirmam C. perfringens tipo A como parte da microbiota de cabras saudáveis e sugere que C. perfringens tipos C e D são raramente encontrados em caprinos saudáveis.

Microbiological quality of honey from stingless bee, jandaíra (Melipona subnitida), from the semiarid region of Brazil / Qualidade microbiológica do mel da abelha sem ferrão jandaíra (Melipona subnitida) da região semi-árida do Brasil

ABSTRACT: The aim of this study was to evaluate the presence of microorganisms in honey produced by the stingless bee (SB) jandaíra (Melipona subnitida) from the semiarid region of Brazil. Thirty-five samples were analyzed and all of them were positive for mesophilic bacteria, coliforms at 45°C, fungi, and yeast. Staphylococcus spp. were identified in 85.7%, while Bacillus spp. were detected in 34.3% of honey samples. DNAs of Clostridium perfringens and C. botulinum were detected in 40% and 2.8% of the samples, respectively. Salmonella spp. and C. difficile were not detected. The present research revealed a great diversity of microorganisms in honey produced by jandaíra.

RESUMO: O objetivo deste trabalho foi avaliar a presença de microrganismos no mel produzido pela abelha sem ferrão jandaíra (Melipona subnitida). Trinta e cinco amostras foram avaliadas e todas foram positivas para bactérias mesofílicas, coliformes a 45 ºC, fungos e leveduras. Staphylococcus spp. foi identificado em 85,7% enquanto Bacillus foi detectado em 34,3% das amostras de mel. Clostridium perfringens e C. botulinum foram detectados em 40% e 2,8% das amostras respectivamente. Salmonella spp. e C. difficile não foram detectados. O presente trabalho revelou uma grande diversidade de microrganismos no mel produzido por jandaíra.

Isolation and genotyping of Clostridium perfringens and Clostridium difficile in Capuchin Monkeys (Sapajus spp.) / Isolamento e genotipagem de Clostridium perfringens and Clostridium difficile em macacos-prego (Sapajus spp.)

ABSTRACT: The importance of Clostridium perfringens and C. difficile for most wild animal species remains unclear. This study aimed to isolate and genotype C. perfringens and C. difficile in stool samples from free-living and captive capuchin monkeys (Sapajus flavius and Sapajus libidinosus) in Brazil. Ten free-living S. flavius and 14 captive S. libidinosus were sampled for this study. To isolate C. difficile, stool samples were inoculated on plates containing cycloserine-cefoxitin fructose agar supplemented with horse blood and sodium taurocholate. Two different protocols for C. perfringens isolation were tested: direct plating onto selective agar and enrichment in brain heart infusion (BHI) broth followed by plating onto selective agar. C. difficile was not detected in the present study. The results were identical for both protocols tested for isolation of C. perfringens. Four samples (16.7%) were positive for C. perfringens type A, including one sample from a free-living animal (4.2%) and three from captive animals (12.5%), meaning there was no significant difference between these two groups. C. perfringens isolates were negative for all additional virulence factors evaluated, including enterotoxin encoding-gene (cpe) and beta-2 encoding-gene (cpb2). These results suggested that C. perfringens type A is found in the microbiota of capuchin monkeys, although it is less frequent than previously reported in domestic animals.

RESUMO: A importância de Clostridium perfringens e C. difficile para a maioria das espécies silvestres ainda não está clara. O objetivo do presente estudo foi isolar e genotipar C. perfringens e C. difficile em amostras de fezes de macacos-prego (Sapajus flavius e Sapajus libidinosus) de vida livre e criados em cativeiros no Brasil. Dez S. flavius de vida livre e 14 S. libidinosus de cativeiro foram incluídos no presente estudo. Para isolamento de C. difficile, as amostras de fezes foram inoculadas em agar cicloserina-cefoxitina frutose, suplementado com sangue e taurocolato de sódico. Para isolamento de C. perfringens, foram testados dois protocolos: plaqueamento direto em ágar seletivo e enriquecimento em caldo seguido de plaqueamento em ágar seletivo. C difficile não foi detectado no presente estudo. Os resultados foram idênticos para ambos os protocolos testados para isolamento de C. perfringens, resultando em quatro animais (16,7%) positivos para C. perfringens tipo A. Destes, uma amostra era de um animal de vida livre (4,2%) e três de animais de cativeiro (12,5%), não havendo diferença entre esses dois grupos. Os isolados de C. perfringens foram negativos para todos os fatores de virulência adicionais avaliados, incluindo o gene codificador de enterotoxina (cpe) e o gene codificador beta-2 (cpb2). O presente estudo sugere C. perfringens tipo A como parte da microbiota de macacos-prego, embora esse agente seja menos frequente como comensal, do que relatado anteriormente, em animais domésticos.

Mapping of the continuous epitopes displayed on the Clostridium perfringens type D epsilon-toxin

Abstract The epsilon toxin, produced by Clostridium perfringens, is responsible for enterotoxemia in ruminants and is a potential bioterrorism agent. In the present study, 15 regions of the toxin were recognized by antibodies present in the serum, with different immunodominance scales, and may be antigen determinants that can be used to formulate subunit vaccines.

Botulism in non-ruminants in Brazil / Botulismo em não ruminantes no Brasil

ABSTRACT: Botulism is an intoxication caused by the ingestion of neurotoxins secreted by Clostridium botulinum and characterized by progressive flaccid symmetrical paralysis. Among non-ruminant animals, avian species and dogs are the most commonly affected by botulism, while horses and pigs are less-commonly diagnosed with the disease. Despite the importance of this disease in animals, the Brazilian literature only includes case studies and outbreak descriptions. The aim of this study was to review the main features and to provide recent data on the occurrence of botulism in non-ruminants in Brazil.

RESUMO: O botulismo é uma intoxicação causada pela ingestão das neurotoxinas secretadas por Clostridium botulinum e caracterizada por uma paralisia flácida simétrica progressiva. Entre os animais não ruminantes, aves e cães são os mais comumente afetados, enquanto equinos e suínos são esporadicamente diagnosticados com a doença. Apesar da reconhecida importância dessa doença nos animais, a literatura brasileira baseia-se apenas em relatos de casos e descrições de surtos. O presente trabalho tem como objetivo revisar a ocorrência e principais característicasdo botulismo em animais não ruminantes no Brasil.

Botulism in ruminants in Brazil / Botulismo em ruminantes no Brasil

ABSTRACT: Botulism is an intoxication caused by the ingestion of neurotoxins secreted by Clostridium botulinum. It affects all warm-blooded animals and some fishes and is characterized by progressive flaccid symmetrical paralysis. Despite the known importance of this disease in ruminants, the Brazilian literature only includes case studies and outbreak descriptions. In addition, the epidemiology of botulism in cattle has markedly changed over the past two decades. The aim of this study is to review these characteristics and to provide recent data on the occurrence of botulism in ruminants in Brazil.

RESUMO: O botulismo é uma intoxicação causada pela ingestão das neurotoxinas secretadas por Clostridium botulinum . A doença afeta todos os animais de sangue quente e alguns tipos de peixes, sendo caracterizada por uma paralisia flácida simétrica progressiva. Apesar da reconhecida importância dessa doença nos ruminantes, a literatura brasileira baseia-se apenas em relatos de casos e descrições de surtos. Além disso, a epidemiologia do botulismo em bovinos apresentou marcantes alterações nas últimas duas décadas. Dessa forma, é essencial uma revisão que elucide as principais características da doença em animais no Brasil. O presente trabalho tem como objetivo revisar tais características, além de fornecer dados recentes sobre a sua ocorrência em ruminantes.

Prevention of Clostridium difficile infection in hamsters using a non-toxigenic strain / Prevenção da infecção por Clostridium difficile em hamsters usando uma estirpe não toxigênica

ABSTRACT: The present study aimed to evaluate five non-toxigenic strains of Clostridium difficile (NTCD) in vitro and to select one strain to prevent C. difficile (CDI) infection in hamsters (Mesocricetus auratus). The NTCD strains were evaluated for spore production in vitro, antimicrobial susceptibility and presence of antimicrobial resistance genes. Approximately 107 spores of the selected strain (Z31) were administered by esophageal gavage in hamsters pretreated with 30mg kg-1 of clindamycin. The challenge with a toxigenic strain of C. difficile was conducted at 36 and 72h, and the animals were observed for 28 days. The NTCD strain of C. difficile (Z31) was able to prevent CDI in all animals that received it.

RESUMO: O presente trabalho objetivou a avaliação in vitro de cinco estirpes não toxigênicas de Clostridium difficile (NTCD) e seleção de uma delas para prevenção de infecção por C. difficile (CDI) em hamsters (Mesocricetus auratus). As estirpes NTCD foram avaliadas quanto à produção de esporos in vitro, sensibilidade antimicrobiana e presença de genes de resistência a antimicrobianos. Aproximadamente 107 esporos da estirpe selecionada (Z31) foram administrados por gavagem esofágica em hamsters previamente tratados com 30mg kg-1 de clindamicina. O desafio com uma estirpe toxigênica de C. difficile ocorreu nos tempos experimentais 36 e 72h, e os animais foram observados por 28 dias. A estirpe NTCD de C. difficile (Z31) foi capaz de prevenir a CDI em todos os animais que a receberam.

Detection of Lawsonia intracellularis fecal shedding in dogs in Minas Gerais, Brazil / Detecção de Lawsonia intracellularis em fezes de cães em Minas Gerais, Brasil

Lawsonia intracellularisis an obligate intracellular bacterium that is responsible for proliferative enteropathy, an enteric disease endemic in swine and common in foals. However, few studies have investigated this disease in dogs, and there are no reports of dogs infected with L. intracellularisin Latin America. The aim of this study was to evaluate the fecal shedding of L. intracellularisin diarrheic and non-diarrheic dogs in Minas Gerais, Brazil. A total of 58 dogs, 18 apparently healthy and 40 diarrheic, were examined in this study. DNA extracted from feces was analyzed using a nested PCR reaction to detect L. intracellularis.Three out of 40 (7.5%) diarrheic samples, all from 3-month-old puppies, were positive for L. intracellularis. These results highlight the need for additional studies to examine the role of this pathogen as a possible cause of enteric disease in dogs

Lawsonia intracellularisé uma bactéria intracelular obrigatória responsável pela enteropatia proliferativa, uma doença entérica endêmica em suínos e comum em potros. Em cães, no entanto, existem poucos estudos sobre essa doença e inexistem relatos de cães infectados por L. intracellularisna América Latina. O objetivo deste estudo foi avaliar a presença de L. intracellularisem amostras de fezes de cães diarréicos e aparentemente saudáveis em Minas Gerais, Brasil. Foram incluídos 58 cães, sendo 18 aparentemente saudáveis e 40 diarréicos. Submeteu-se o DNA bacteriano fecal a uma reação de PCR nested para L. intracellularis. Três das 40 (7,5%) amostras de cães diarréicos foram positivas para L. intracellularis, estando todos esses animais com aproximadamente 3 meses de idade. Estes resultados salientam a necessidade de mais estudos para confirmar o papel deste patógeno como uma possível causa de doença entérica em cães

Jejunal hemorrhage syndrome in a Zebu cow in Brazil / Síndrome de jejuno hemorrágico em gado Zebu no Brasil

Clostridium perfringens type A has been incriminated as the etiologic agent in jejunal hemorrhage syndrome (JHS), which is a disease that affects dairy cattle. Although this microorganism is considered an important enteropathogen the pathogenesis of JHS is still not clear, and there have been no reports of its occurrence in Brazil so far. The aim of this study was to describe the occurrence of JHS by infection with a C. perfringens type A strain carrying the beta-2 toxin gene in a zebu cow in Brazil, for the first time.

Clostridium perfringens tipo A tem sido considerado agente etiológico da síndrome do jejuno hemorrágico (SJH), que é uma doença que afeta comumente os rebanhos de gado. Embora este microrganismo seja considerado um importante enteropatógeno, a patogênese da SJH ainda não foi elucidada, e não havia sido reportada no Brasil até então. O alvo deste estudo foi descrever pela primeira vez a ocorrência da SJH causada por C. perfringens tipo A, carreador do gene da toxina beta-2, em um zebuíno no Brasil.

Histopathological, immunohistochemical and biomolecular diagnosis of myocarditis due to Clostridium chauvoei in a bovine / Diagnóstico anatomopatológico, imuno-histoquímico e biomolecular de um caso de miocardite por Clostridium chauvoei em um bovino

The aim of this study was to report a case of clostridial myocarditis in a bovine in Brazil with emphasis on the pathological findings, isolation and molecular identification associated with the in situ localization of C. chauvoei. The animal, a male Brangus bull with nine months of age, was found dead without prior clinical signs. Multifocal and coalescent areas of necrosis were observed in the myocardium. Rod cells in the cardiac muscle fibers were positive immunostaining for C. chauvoei, while this bacterium was also isolated and identified by polymerase chain reaction (PCR).

O objetivo deste estudo foi relatar um caso de miocardite clostridial em um bovino no Brasil, com ênfase nos achados patológicos, isolamento e identificação molecular do agente e visualização in situ de C. chauvoei. O animal, um macho da raça Brangus com nove meses de idade, foi encontrado morto sem sinais clínicos prévios. Foram observadas áreas de necrose multifocal e coalescente no miocárdio, com a presença de bastonetes imunomarcados para C. chauvoei nas fibras musculares cardíacas. Uma estirpe de C. chauvoei foi isolada do tecido e sua identidade foi confirmada por reação em cadeia da polimeras (PCR).

Clostridium perfringens: a review of the disease in pigs, horses and broiler chickens / Clostridium perfringens: uma revisão da doença em suínos, equinos e frangos de corte

Clostridium perfringens is a gram-positive, anaerobic, fermentative, spore-forming bacillus that may be found in the environment but is more commonly found as part of the microbiota of humans and animals. The bacterium is considered a common enteric pathogen; however, the pathogenesis and predisposing factors of the disease can differ among species. Therefore, specific studies are necessary for understanding the role of this pathogen, how to diagnose it and which control measures are applicable. The aim of this paper is to review the current knowledge regarding C. perfringens infections in pigs, horses and broiler chickens.

Clostridium perfringens é um bacilo anaeróbio, Gram positivo, formador de esporos que pode ser encontrado no ambiente e, principalmente, como parte da microbiota de humanos e animais. É considerado um patógeno entérico comum, mas a patogênese e os fatores predisponentes da doença normalmente diferem entre as espécies, sendo necessários estudos específicos para compreender os mecanismos de ação do patógeno, como diagnosticá-lo e apresentar quais as medidas de controle são aplicáveis. O objetivo deste trabalho é revisar as atuais descobertas a respeito da infecção de C. perfringens em suínos, equinos e frango de corte.

Surto de botulismo tipo C em aves domésticas no semiárido do Nordeste, Brasil / Outbreak of type C botulism in poultry in the semiarid Northeast, Brazil

O presente estudo tem como objetivo relatar um surto de botulismo tipo C em galinhas (Gallus gallus domesticus), patos (Anas platyrhynchos) e em galinhas-d'-angola (Numida meleagris) criadas no semiárido do Rio Grande do Norte, Brasil. As aves incluídas neste estudo foram oriundas de um criatório com 80 animais, sendo 48 galinhas, 12 patos e 20 galinhas-d'angola. Os animais apresentaram paralisia flácida simétrica das patas, asas, pescoço e pálpebras, desprendimento de penas e dispneia. Vinte e quatro horas após início dos sinais clínicos constatou-se a mortalidade de 30 aves (37,5%). Após 48 horas, os 50 animais restantes também apresentaram sinais clínicos similares e vieram a óbito. Três aves com sinais clínicos de botulismo foram enviadas ao Laboratório de Patologia Veterinária da Universidade Federal Rural do Semi-Árido, onde coletou-se sangue e realizou-se necropsia seguida de avaliação anatomopatológica. Não foram observadas lesões macro e microscópicas nos órgãos da cavidade celomática e encéfalo. As alíquotas de soro foram encaminhadas para o Setor de Clostridioses do Laboratório Nacional Agropecuário de Minas Gerais (LANAGRO-MG) para pesquisa da toxina botulínica por soroneutralização em camundongos, que resultou na detecção da toxina botulínica tipo C. Este é o primeiro relato de botulismo em aves na região Nordeste do Brasil, e a primeira descrição da doença em galinhas d'Angola.

This study aims to report an outbreak of type C botulism in chickens (Gallus gallus domesticus), ducks (Anas platyrhynchos) and guinea fowls (Numida meleagris) created in semiarid region of Rio Grande do Norte, Brazil. The birds included in this study were derived from a farm with 80 animals (48 chickens, 12 ducks and 20 guinea fowls). The birds had symmetrical flaccid paralysis of the legs, wings, neck and eyelids, shedding feathers and dyspnea. After 24 hours of onset of clinical signs, 30 (37.5%) of the birds were found dead. After 48 hours, the 50 remaining animals also showed similar clinical signs and came to death. Three birds with clinical signs of botulism were sent to the Laboratory of Veterinary Pathology, of the Universidade Federal Rural do Semiárido, where blood was collected and held necropsy followed by histopathologic evaluation. There were no gross and microscopic lesions in the organs of the coelomic cavity and brain. There were no gross and microscopic lesions in the organs of the coelomic cavity and brain. The serum samples were sent to the Clostridial Section of the Laboratório Nacional Agropecuário de Minas Gerais (LANAGRO- MG) to search botulinic toxin by serumneutralization, which resulted in the detection of type C botulinic toxin. This is the first description of botulism in avian in the Northeastern Brazil and the first report of the disease in guinea fowls.

Padronização de um modelo de infecção por Clostridium difficile em hamsters sírios Mesocricetus auratus / Standardization of a model of Clostridium difficile infection in syrian hamsters Mesocricetus auratus

O objetivo do presente trabalho foi padronizar um modelo de infecção por Clostridium difficile (ICD) em hamsters sírios (Mesocricetus auratus). Para seleção dos isolados capazes de causar letalidade, cinco animais por grupo receberam uma dose de clindamicina (30mg kg-1) por gavagem. Após 48 horas, administraram-se 107 unidades formadoras de colônia (UFC), por animal, de quatro diferentes isolados toxigênicos de C. difficile. Selecinou-se um dos isolados capazes de causar diarreia e letalidade e administrou-se 4x102; 4x104; 4x106; 4x108UFC por animal, novamente com cinco hamsters por grupo. Em todas as diluições testadas, foi possível observar a ocorrência de diarreia e morte. A maior concentração testada (4x108UFC por animal) causou óbito de 100% dos hamsters do grupo. Todos os animais que vieram a óbito apresentaram tiflite hemorrágica, foram positivos para as toxinas A/B e foi possível isolar C. difficile do conteúdo intestinal, confirmando a reprodução experimental da doença. A dose letal para 50% da população foi estabelecida em 6,3x104UFC por animal. O modelo de indução de ICD em hamsters descritos no presente estudo passa a ser uma ferramenta valiosa para estudos relativos à patogenia, tratamento e controle dessa doença.

The aim of this study was to standardize a model of Clostridium difficile infection (CDI) in Syrian hamsters (Mesocricetus auratus). In order to evaluate strains capable of causing lethality, five hamsters per group received clindamycin (30mg kg-1) by gavage. After 48 hours, 107 colony forming units (CFU) of spores' solution of four strains were administered per animal. One strain capable of causing diarrhea and death was selected and administered at the following concentrations: 4x102; 4x104; 4x106; 4x108 CFU per animal. All dilutions tested were able to cause diarrhea and death. The highest concentration showed 100% of mortality. Post mortem evaluation revealed hemorrhagic typhlitis in all death animals. In addition, all intestinal contents were positive for A/B toxins, and toxigenic C. difficile strains were isolated, confirming the induction of infection by this microorganism. The dose lethal to 50% of the population was calculated: 6.3x104 CFU per animal. The standardized model of CDI in hamster is now available for studies on pathogenesis, treatment and control of this disease.

Evaluation of three enzyme immunoassays and a nucleic acid amplification test for the diagnosis of Clostridium difficile-associated diarrhea at a university hospital in Brazil

Introduction Despite the known importance of Clostridium difficile as a nosocomial pathogen, few studies regarding Clostridium difficile infection (CDI) in Brazil have been conducted. To date, the diagnostic tests that are available on the Brazilian market for the diagnosis of CDI have not been evaluated. The aim of this study was to compare the performances of four commercial methods for the diagnosis of CDI in patients from a university hospital in Brazil. Methods Three enzyme immunoassays (EIAs) and one nucleic acid amplification test (NAAT) were evaluated against a cytotoxicity assay (CTA) and toxigenic culture (TC). Stool samples from 92 patients with suspected CDI were used in this study. Results Twenty-five (27.2%) of 92 samples were positive according to the CTA, and 23 (25%) were positive according to the TC. All EIAs and the NAAT test demonstrated sensitivities between 59 and 68% and specificities greater than 91%. Conclusions All four methods exhibited low sensitivities for the diagnosis of CDI, which could lead to a large number of false-negative results, an increased risk of cross-infection to other patients, and overtreatment with empirical antibiotics. .